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2分钟!带您快速了解液相色谱柱

点击次数:473     更新时间:2023-02-24
  色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。用于HPLC的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10um等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难的分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
 
  液相色谱柱的柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到较佳效率,除柱外死体积要小外,也要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使较好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍料径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
 
  液相色谱柱的规则:
 
  色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类
 
  ①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm,柱长10~30cm;
 
  ②窄径柱(narrowbore),内径1~2mm,柱长10~20cm;
 
  ③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;
 
  ④半制备柱,内径>5mm;
 
  ⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;
 
  ⑥生产制备柱内径可达几十厘米。
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